青島能源所實(shí)現(xiàn)細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)靜電相互作用的直接測(cè)量
靜電相互作用在酶催化、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用、蛋白質(zhì)-DNA/RNA相互作用和H+的轉(zhuǎn)移等生物反應(yīng)過(guò)程中起到重要作用,但絕大多數(shù)蛋白質(zhì)都是在細(xì)胞中執(zhí)行其功能,復(fù)雜細(xì)胞環(huán)境可以動(dòng)蛋白質(zhì)的靜電相互作用。
近日,中國(guó)科學(xué)院青島生物能源與過(guò)程研究所蛋白質(zhì)設(shè)計(jì)研究組研究員姚禮山團(tuán)隊(duì)在細(xì)胞內(nèi)原位定量測(cè)量蛋白質(zhì)靜電相互作用研究中取得進(jìn)展,應(yīng)用核磁共振技術(shù)和雙突變循環(huán)(double? mutational cycle,DMC)方法,測(cè)量了細(xì)胞內(nèi)IgG結(jié)合蛋白質(zhì)GB3中的8對(duì)電荷相互作用,并與在胞外條件測(cè)量的結(jié)果進(jìn)行比較。研究表明,蛋白質(zhì)GB3中5對(duì)電荷的靜電相互作用沒(méi)有明顯變化,另外3對(duì)電荷的靜電相互作用減弱了70%以上。進(jìn)一步研究表明,細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)靜電相互作用強(qiáng)弱與蛋白質(zhì)折疊轉(zhuǎn)移自由能有關(guān),折疊態(tài)和解折疊態(tài)的轉(zhuǎn)移自由能都影響細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)靜電相互作用,盡管后者通常比前者的影響更大。研究結(jié)果凸顯了在細(xì)胞內(nèi)直接研究蛋白質(zhì)相互作用和蛋白質(zhì)功能的重要性。
相關(guān)成果發(fā)表在Journal of the American Chemical Society上。研究得到國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃、國(guó)家自然科學(xué)基金、山東省人才項(xiàng)目、中科院青促會(huì)項(xiàng)目和山東能源研究院科研創(chuàng)新基金等項(xiàng)目支持。

在胞外條件和細(xì)胞內(nèi)測(cè)量的GB3電荷對(duì)之間靜電相互作用的相關(guān)性
來(lái)源:中科院


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